紫外交联仪UCL-3500用于RecA突变筛选

紫外交联仪UCL-3500在RecA突变筛选中的应用

RecA突变体筛选：即让缺失recA基因的菌株在紫外交联仪（jiaolianyi）下面照射，没有缺失的会通过自己修复而存活，缺失的则死亡。

RecA是大肠杆菌中recA基因座的产物，具有双重功能，能激活蛋白酶并能改变单链DNA分子。蛋白酶-激活活性控制SOS 反应；核酸酶活性涉及重组修复途径。

RecA recA基因产物具有三种生物化学活性：重组活性，单链DNA结合活性和ATP酶活性。

RecA蛋白是一种形如纤维,每次通过初形成单体进行伸长和收缩活动的蛋白,在修复受损DNA的过程中发挥重要作用。

是recA基因的产物，分子量约38 000D，为含4个亚基的四聚体。即使DNA分子有断裂或“空隙”，两个DNA分子也不一定重组。必须有推动重组反应的酶存在，重组才能进行。在这些酶中主要的是RecA蛋白，它能促使两个同源DNA分子的碱基配对，形成杂种分子。

反之，两条完整的同源双链螺旋DNA，即使和RecA蛋白一起混合，也不会发生重组反应。RecA蛋白能特异地识别单链DNA，并能将之与同源双螺旋中的互补顺序“退火”，同时将另一条链排挤出去，形成所谓D环（D－LOOP）。

RecA蛋白是一种多功能蛋白质，它参与大肠杆菌的同源重组途径，有单体和多聚体两种形式。多聚体由单体在单链DNA上从5′→3′方向组装而成。

RecA的主要功能包括：

1.促进2个DNA分子之间链的交换；

2.作为共蛋白酶促进LexA 阻遏蛋白的自我水解

RecA蛋白在同源重组的具体作用分为3个阶段：

1.RecA的个DNA结合位点（初级位点）与单链DNA结合，包被DNA，形成蛋白质-DNA丝状复合物；

2.RecA的第二个DNA结合位点（次级位点）与1个双链DNA分子结合，形成三链DNA中间体，随后单链DNA侵入双链DNA，寻找同源序列；

3.RecA催化链交换，由被RecA包被的单链DNA从5′→3′方向取代双链DNA分子之中的同源旧链，形成异源双链，并发生分叉迁移。

为什么UCL-3500紫外交联仪深受科研工作者的喜爱？

1. UCL-3500内置有高精度紫外线传感器，能够准确计量紫外辐照能量。

2. 安装六根15w 紫外线灯管，辐照强度高，缩短实验时间。

3. 大面积辐照室，能够同时进行多组实验。

4. 铝合金辐照腔，散热快，辐照腔温度变化小，满足照射细胞实验需求。

5. 保修时间长，国内有维修站，维修便捷。