GFP标记到表达的烟草叶片为什么有红色荧光？

GFP标记到表达的烟草叶片为什么有红色荧光？

经常有同学咨询，我用LUYOR-3415RG GFP便携式双波长荧光蛋白激发光源观察GFP才烟草叶片的表达，为什么会有红色荧光，有的是整片叶片都是红色荧光，有的有绿色荧光表达，也有红色荧光，究竟是什么原因，现在，我们给大家解释说明一下：

因为，烟草叶片含有大量的叶绿素，叶绿素在蓝色波段照射时候，会发出红色荧光。具体叶绿素的激发光和发射光的光谱图如下：

由上图可以看出，叶绿素a和叶绿素b的激发波段400-500nm。主峰在460nm，属于蓝光，发射波段为620-680nm，属于红光波段。

所以，如果用LUYOR-3415RG照射烟草叶片，如果叶片没有表达GFP或者GFP表达量太低，会看到整个叶片都是红色。如果叶片上有很高的GFP表达，在叶片表达的位置会有绿色荧光。见下图：

如果您不希望看到叶绿素红色荧光，您可以选择LUV-30AG绿色观察眼镜，这款荧光蛋白观察眼镜采用带通隔离，能够隔离500nm以下和580nm以上的波段，这样就看不到叶绿素的红色荧光。拍照可以选择LUV-520A拍照滤镜，这款拍照滤镜，也是采用带通滤光片，有效隔离掉了叶绿素的红色荧光，您可以参考阅读《如果选购荧光蛋白拍照滤镜 》LUV-30AG和luv-520a的观察、拍照效果如下：

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