台式紫外线灯XX-15C来进行菌种诱变育种

使用XX-15C紫外线灯来进行菌种诱变育种

美国路阳公司生产的XX-15C台式紫外线灯，安装有2根15w 254nm，镜面铝合金反光板，隔板可调台式支架，是实验室紫外照射的便捷工具。

波长254nm的紫外线，正好是食用菌遗传变异物质一核酸的吸收髙峰，菌种细胞即使受到紫外线的轻度照射，也会使遗传物质一一脱氧核糖核酸（DNA）发生巨大的变化。 常见的变化有：DNA键的断麵,氢键飭断裂，嘧啶的水合化， 胸腺嘧啶二聚体的形成，八分乇内和分子间的交联等。 所以，紫外线是诱导食用菌,其它擀生物菌种发生变异的诱变剂，在诱变的基础上，就可能选育出优良的菌种来。

用XX-15C台式紫外线灯进行紫外线诱变育种，首先应准备孢子悬浮液。将新鲜食用菌无菌孢子移入5毫升无菌生理食盐水（经灭菌处理 的0.9%溶液），或磷酸缓冲溶液（由15克磷酸氢二钠和2克磷酸二氢钾共溶于1000亳升经灭菌而得的蒸馏水）中，摇匀后即成孢子悬浮液，萁浓度以每毫升含孢子100万至1亿 个为宜。

诱变时，在暗室内开启XX-15C台式紫外线灯，调整紫外线灯台式支架的隔板高度。开始先开灯20分钟，波长稳定后取5亳升孢子悬浮液 倒入直径6厘米的无菌培养皿中，揭开皿盖，摇动培养皿， 使照射均匀，照射时间0.5—1.0分钟，照射后的抱子悬浮液每毫升含活孢子数在10—1000万个之间。要得到单菌落，得 先用无菌水樣释至每亳升10—100个，再取稀释液0.2毫升， 涂布于装有琼脂的培养皿上，在25℃温度下培育5—10天， 待菌落出现后，选纯正、健壮的单菌落移入斜面试管培养， 并做拮抗试验。

拮抗试验是取处理和未处理的菌丝各一块，接在同一斜面上，相距1 一2厘米，如处理后的孢子已发生变异，其菌丝与未处理的菌丝在相接处就会发生拮抗，形成一条明显的拮抗线；若未发生变异，则两方面的菌丝相连接成一体。

XX-15C台式紫外线灯支架有多个档位可以调节，方便老师做不同距离、不同强度的紫外线诱变照射实验

美国路阳 XX-15A/XX-20A/XX-40AA实验室用紫外线灯

文章转自：http://www.luyor.cn/news/case/560.html 

紫外交联仪UCL-3500用做紫外诱变箱，紫外诱变仪

紫外诱变育种的原理是什么？

诱变育种决定生物遗传物质DNA的吸收光谱（200-300nm）处于紫外线光谱中。当生物的DNA吸收紫外线后，分子机构发生很大变化，这种变化可能会导致DNA遗传性大幅度的改变，并在多数情况下因为这种改变导致细胞无法正常繁殖和代谢而在短期内死亡，但少量存活细胞中包含的基因突变并具有一定的存活能力，提取这些细胞经过一段的培养，可以选择出有益的变异株加以扩大培养，从而得到希望的品种。

用哪个波段紫外线进行紫外诱变育种？

紫外交联仪UCL-3500内置了6根254nm紫外线灯管，紫外辐照均匀，可以根据自己需要设定辐照时间，也可以根据能量设置辐照能量值。

紫外诱变育种能量是多少？

因不同细胞的吸收能量不同，照射能量由实际育种要求而定，通常，需要控制发生突变的且能存活下来的比例在10-50%即可。

微生物育种的目的就是要人为地使某些代谢产物过量积累,把生物合成的代谢途径朝人们所希望的方向加以引导,或者促使细胞内发生基因的重新组合优化遗传性状,获得所需要的高产、优质和低耗的菌种。诱变和筛选则是微生物育种的两个主要环节。

 育种可分为自发性突变育种和诱发突变育种。但是自发突变的频率很低，一般在 10 -6 ~10 -10 ，而诱变育种频率较高。诱变育种就是利用物理和化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群，大幅度提高突变频率，然后设法采用简便、快速和高效的筛选方法，从中挑选少数符合育种目的的突变株。诱变育种除能提高产量外，还可达到改进产品质量、扩大品种和简化生产工艺等目的，是目前广泛使用的育种手段。

 诱变育种主要通过物理诱变剂（如：紫外线、X-射线、γ-射线、快中子、激光、超声波等）和化学诱变剂（如亚硝酸、硫酸二乙酯、亚硝基胍、吖啶类染料等）处理微生物群体细胞，通过合理的筛选程序和方法，从中选出遗传物质分子结构发生改变的少数细胞。常利用形态突变型、生化突变型、条件致死突变型和致死突变型进行初筛而获得优良性状的突变株。诱变育种方法简便，容易掌握，仍是目前行之有效的一种重要育种手段，但自觉性、方向性差。

物理诱变因子中以紫外线辐射的使用为普遍，其他物理诱变因子则受设备条件的限制，难以普及。一般用于诱变育种的物理因子有快中子、60Co、γ-射线和高能电子流β-射线等。紫外线作为物理诱变因子用于工业微生物菌种的诱变处理具有悠久的历史，尽管几十年来各种新的诱变剂不断出现和被应用于诱变育种，但到目前为止，对于经诱变处理后得到的高单位抗生素产生菌种中，有80%左右是通过紫外线诱变后经筛选而获得的。因此，对于微生物菌种选育工作者来说，紫外线作为诱变因子还是应该首先考虑的。

紫外线可以引起的 DNA 损伤，可使同链 DNA 的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体，二聚体的出现会减弱双链间氢键的作用，并引起双链结构发生扭曲变形，阻碍碱基间的正常配对，从而可能引起突变或死亡。

在传统的物理诱手段中，紫外线诱变由于有设备简单，诱变效率高,操作安全简便等特点而被广泛应用。经大量实验证明利用紫外诱变的方法能选育出大量产量高，活性强的优良微生物菌种。本实验将利用紫外诱变法，筛选出利福平抗性更高的菌株。