触发gfp发出荧光的光源有哪些?
GFP又名 wtGFP, avGFP, gfp10, 绿色荧光蛋白
GFP绿色荧光蛋白是一种基本的(构成荧光的)长斯托克斯位移荧光蛋白,发表于1992年,来源于Aequorea victoria。它对酸的敏感性低。GFP激发光的波长是395nm,mEGFP发射光的波长是509nm。
很多同学觉得GFP和EGFP、avGFP都是绿色荧光蛋白,激发波长应该都一样,用便携式荧光蛋白激发光源的450nm波段去观察GFP的表达,但有时候无法看到gfp的荧光表达,不知道是设备原因还是没有表达成功。
大家在观察荧光蛋白表达之前,一定要看自己质粒图谱用的到底是哪种GFP,如果是GFP、wtGFP、avGFP必须用紫外光源去激发(365nm波段,LUYOR-3280UV应该手电筒),如果的eGFP、mEGFP那要蓝光波段(450nm LUYOR-3280RB)去激发。
EGFP绿色荧光蛋白是1996年发表的一种碱性(构成性荧光)绿色荧光蛋白,来源于Aequorea victoria。据报道,它是一种快速成熟的弱二聚体,具有中等酸敏感性。mEGFP激发光的波长是488nm,mEGFP发射光的波长是507nm。
mEGFP绿色荧光蛋白是2002年发表的一种碱性(构成性荧光)绿色荧光蛋白,来源于Aequorea victoria。它具有中等酸敏感性。mEGFP激发光的波长是488nm,mEGFP发射光的波长是507nm。
sfGFP绿色荧光蛋白的激发波长主峰在488nm,发射波长主峰在507nm。
常用的报告基因包括:lacZ、Egfp 、zsGreen、EYFP、DsRed (DsRed2)、mRFP、mCherry、HuCD2、Thy1.1、HA tag、FLAG tag、Luciferase等。zsGreen和EGFP, EYFP都是绿色荧光。EGFP和EYFP很难区分开。zsGreen是一个比较稳定的绿色荧光蛋白。DsRed和TdTomato都是红色荧光。TdTomato是一个信号非常强的荧光蛋白,对细胞/小鼠也没有明显的毒性。mRFP和mCherry是两个非常好的荧光蛋白,需要530nm的激发光,所以可以用LUYOR-3415RG荧光蛋白观察灯激发,能够用肉眼观察到荧光蛋白在小鼠上的表达。
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