紫外线是100-400nm之间电磁波谱的一部分。如表1所示,紫外光谱分为三类,UVA,UVB和UVC。在地球上,UVC被大气中的分子氧阻挡,但UVA和UVB很容易传播到地球表面。
经历过晒伤的人可以证明紫外线的危险力量。虽然紫外线可能是有害的,从直接应用到卫生设施,再到我们对紫外线如何影响我们生物学的基本了解,它有助于改善人类健康。
表 1.紫外线波长。
紫外线通用名称 | 波长(纳米) | UVP 交联仪,CL-3000 波长 (nm) |
---|---|---|
UVA | 315-400 | 365 |
UVB | 280-315 | 302 |
UVC | 200-280 | 254 |
真空紫外线 | 100-200 | 不适用* |
*耶拿分析不生产真空紫外线产品
紫外线已被用于破坏空气中的微生物,防止表面上微生物的生长以及液体灭菌超过120年的应用中。
例如,自1877年以来,人类一直使用紫外线进行食品保存/灭菌。1;紫外线在20世纪30年代开始在手术室中使用,以对空气进行2;自20世纪初以来,紫外线已被用于对饮用水进行断断续续的3.
在前面提到的应用中,使紫外线具有有效性的相同特性使其对生物有机体具有危险性。在紫外线照射时,在分子水平上,核酸链中的相邻嘧啶可以发生二聚化,这主要发生在胸腺嘧啶碱之间4–6.
近100年来,研究人员利用紫外线的这种特性作为研究基因突变的工具。
事实上,是紫外线诱导的,而不是X射线诱导的8突变将与赫尔曼·穆勒(Herman Muller)1928年具有里程碑意义的苍蝇实验有关,如果早期利用紫外线诱变特性的尝试成功。7这些后来为他赢得了1946年的诺贝尔奖 - 毕竟,在他职业生涯的后期,紫外线成为他实验室的流行策略。9–16.
然而,研究人员迟迟未能确定产生诱变特性的紫外线的佳波长(即254nm或UVC)。研究人员发现,紫外线在滴定后的蛋白质溶液中产生凝固物。17,18.这是单独完成的,大约在穆勒具有里程碑意义的工作之前十年。
后来,蛋白质研究人员将了解产生这种凝固的潜在机制是二硫桥的破坏和色氨酸残基的修饰。19.总之,这些发现为基于紫外线的细胞和分子生物学及其他领域的应用铺平了道路。
自1993年以来,耶拿分析公司一直在使用UVA、UVB和UVC光制造UVP紫外交联仪,以涵盖一系列应用,这些应用总结在图1中。
图 1. 使用Textspresso的Pub Med Central的UVP紫外交联仪的应用摘要。我们使用Textspresso开采了Pub Med Central。20识别UVP紫外交联仪的独特命中率。我们确定了 212 个匹配项,为简单起见,这些命中数分为大类。
这些应用包括:
光稳定性验证
突变生物学(生存测定、紫外线诱导的突变、应激试验)
聚合物固化(例如甲基丙烯酸酯树脂、水凝胶)
膜交联(北/南印迹,EMSA)
微生物失活(例如细菌、真菌、病毒)
双分子交联(PAR-CLIP-seq,pBpa,CLIP-seq,iCLIP-seq,sulfo-SDA,psoralen)
这些应用依赖于可重复的高强度紫外线剂量。耶拿分析的新型号是UVP紫外交联仪CL-3000,如图2A所示。它采用内置辐射计设计,该辐射计根据NIST可追溯标准进行校准,以确保无论何时何地,剂量一致。
此外,CL-3000可以产生高达10 J / cm的累积剂量2.通过将UV源和反射外壳靠近样品,可以实现高度均匀的照明(图2B和2C)。
照明表面的中心为6.0%,而整个照明表面的变化系数为17.3%。与Analytik Jena的仪器一样,终用户的安全至关重要,因此交联仪具有安全联锁功能,可防止意外的紫外线照射。
图 2.配备 254 nm UVC 紫外线灯管的 Analytik Jena UVP 交联仪的均匀性。
A) UVP CL-3000 交联仪的轮廓图像。
B) 以 mJ/cm 为单位描绘集成辐射计读数位置的图表2具有总照明表面(总 CV)和照明表面中心(中心 CV)的尺寸和报告变异系数 (CV) 计算。
C)辐射计读数的箱须图摘要。总 CV: 平均值 = 104.9, SD = 18.16;中心 CV:平均值 = 117.9,SD = 7.1。我们建议用户将样品放在照明表面的中心。放置在中心的样品将至少接收输入能量剂量。如果用户想将样品放在前面和后面的位置,我们建议购买UVP 254 nm辐射计(P / N 97-0015-02)和传感器(97-0016-01)来校准剂量。
耶拿UVP紫外交联仪CL-3000
Analytik Jena UVP紫外交联仪CL-3000能够以时间或通量/剂量的形式进行用户输入,单位为mJ / cm2.鉴于环境变量和紫外线灯管的年龄会影响紫外线输出,建议用户推迟进入通量而不是时间。用户将发现两者都用于科学文献。
用户只需转换为 mJ/cm2如果报告了流量,则这是用于此仪器输入的测量单位。一个转换示例可以在表 2 的 Fluence 下看到。
如果报告通量率,通常以 μW/cm 为单位2,此值将伴随曝光时间。用户必须将流量率转换为mW /cm2,示例转换可以在表 2 的“通量率”下看到。
此外,用户必须将曝光时间转换为秒(例如,10 分钟 = 600 秒)。下面显示了示例方案和计算。
表 2. 紫外光测量的重要转换。
紫外能量换算 | |||
---|---|---|---|
µJ/cm2 | mJ/cm2 | J/cm2 | J/m2 |
1,000,000 | 1,000 | 1 | 10,000 |
紫外强度强度 | |||
µW/cm2 | mW/cm2 | W/cm2 | W/m2 |
1,000,000 | 1,000 | 1 | 10,000 |
*文献中的值常报告为以 mJ/cm2 or J/m2 。.在某些情况下,用户报告通量率(例如 μW/cm2),在这种情况下,用户应使用公式1来确定通量(或剂量)。
示例方案和计算
一名研究人员将甲型流感病毒暴露在1000 uW/cm2 10分钟。将报告的紫外线剂量转换为mJ /cm2.
等式 1
能量:(mW/cm2)* Time(sec) = Fluence/Does (mJ/cm2)
1 mW/cm2 * 600 sec = 600 (mJ/cm2)
样品的放置
建议用户将样品放在CV= 6%的照明表面中心(图2B,2C)。放置在中心的样品将接收小的能量剂量。由于边缘效应,放置在后部和前面位置的样品将接收到小于输入剂量的样品。
如果用户想要校准边缘的紫外线剂量,则应购买UVP 254nm辐射计(P / N 97-0015-02)和传感器(97-0016-01)。这是为了在仪器的照明表面上确定低的紫外线剂量。
例如,图2B将前面和右边的位置显示为低剂量(78.18 mJ/cm)2) 时 100 毫焦/厘米2已输入。因此,为了考虑边缘效应,用户可以考虑输入更高的剂量(例如125 mJ / cm2).
美国耶拿UVP紫外交联仪CL-3000技术参数
技术规格 | CL-3000系列 |
---|---|
波长 | 254 纳米, 302 纳米, 365 纳米 |
紫外线灯管 | 6 x 8 瓦 |
能源 | 0000.1 - 9999.9 毫焦/平方厘米 |
时间 | 000:01 - 999:59 毫毫米:秒 (>300J/平方厘米) |
温度 | 15°C - 35°C |
湿度 | 70% 无冷凝 |
高度 | 高达 3,000 米(9,842 英尺) |
声级 | ≤ 50分贝 |
外壳表面温度 | ≤ 30°C |
启动时间 | < 1 秒 |
外部调光(长 x 宽 x 高) | 41 厘米 x 40 厘米 x 26.5 厘米 |
内部调光(长 x 宽 x 高) | 35 厘米 x 27 厘米 x 16 厘米 |
重量 | 6.8千克:15磅 |
工作功率 | 100 - 115VAC 和 230VAC 50/60Hz |
认证 | CE, RoHS (CSA 进行中) |
美国耶拿UVP紫外交联仪CL-3000部件号
零件编号 | 描述 | |
---|---|---|
115V | 230V | |
849-95-0615-01 | 849-95-0615-02 | UVP 交联仪 (CL-3000), 254 nm |
849-95-0615-03 | 849-95-0615-04 | 紫外光防紫外线交联仪 (CL-3000M), 302 纳米 |
849-95-0615-05 | 849-95-0615-06 | UVP 交联仪 (CL-3000L), 365 nm |
34-0007-01 | 849-057-007 | 替代紫外线管,8 瓦,254 nm |
34-0042-01 | - | 替换紫外线管,8 瓦,302 nm |
34-0006-01 | - | 替换紫外线管,8 瓦,365 nm |
参考文献和延伸阅读
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上海峰志仪器有限公司现货供应美国耶拿(美国UVP)CL-3000、美国spectroline公司的XL-1000\XL-1500、美国路阳公司生产的UCL-3200\UCL-3500紫外交联仪。
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