瞬态转染和稳定转染有什么区别
瞬态转染和稳定转染之间的主要区别在于,在瞬时转染中,外源基因不整合到基因组中,而在稳定转染中,外源基因整合到基因组中。 此外,基因表达在瞬时转染中发生的时间很短,而基因表达在稳定转染中发生较长的时间,因为外源基因经过几代。
瞬时和稳定转染是将外来遗传元件转染成真核细胞的两种方法。一般来说,这两种类型的转染在生物技术中都有重要的应用。
什么是瞬时转染
瞬时转染是一种转染,其中外源基因进入细胞但不整合到基因组中。因此,外来基因不会在真核细胞内进行复制。因此,它会随着时间的推移而降解,同时通过细胞分裂稀释。瞬态转导的主要特征是它只允许短期基因表达。
图1:GFP融合蛋白瞬时转染到S2细胞中
此外,一般来说,用于转染基因的载体也具有报告基因,可以监测真核细胞内外源基因的表达。此外,报告基因允许监测细胞内外源基因的存在。
什么是稳定转染
稳定转染是另一种类型的转染,其中外源基因通过整合到染色体或染色体外表观体中并入真核细胞的基因组。因此,稳定转染的主要特征是它允许外源基因代代相传。此外,由于整合到基因组中,外源基因在细胞系内持续更长的时间,从而产生“高而稳定的基因表达。
图2:稳定转染
此外,稳定转染中的整合构建体包含可选择的创客,以识别成功整合到基因组中的构建体以及基因表达水平。
瞬态转染和稳定转染的相似性
瞬时和稳定转染是将外源基因引入真核细胞的两种方法。 外源基因的表达发生在这两种方法中。 此外,这些方法在生物技术中具有不同的应用。
GFP在烟草叶片的瞬时表达(LUYOR-3415RG激发光源照射下发出绿色荧光)
瞬态转染和稳定转染的区别
瞬时转染是指不参与将外源DNA整合到真核细胞基因组中的转染方法,而稳定转染是指参与将外源DNA整合到真核细胞基因组中的转染方法。 因此,这解释了瞬时转染和稳定转染之间的主要区别。
检测所需的时间:瞬时转染检测需要3-4周才能完成,而稳定的转染需要12-18周才能完成。
遗传变化:真核细胞中的瞬时转染不会改变,而稳定的转染会在真核细胞中产生性的遗传变化。
传给后代: 瞬时转染不允许外源DNA代代传递,而稳定的转染允许外源DNA代代相传。
基因表达周期:瞬时转染允许基因表达短时间长达24至96小时,而稳定的转染允许基因表达更长的时间。
表达式级别:虽然瞬时转染的表达水平相对较低,但稳定转染具有高而稳定的表达。
成本:瞬态转染和稳定转染之间的另一个区别是瞬时转染相对便宜,而稳定转染昂贵。
应用
瞬时转染对于短期基因表达研究(包括小规模蛋白质生产和基因敲低测定)非常重要,而稳定的转染对于长期基因调控、大规模蛋白质生产、稳定细胞系的产生、基因治疗等非常重要。
结论
简而言之,瞬时转染是一种外源基因不整合到真核细胞基因组中的转染类型。因此,外来基因不会经过几代细胞。此外,这种类型的转染仅允许在短时间内表达外源基因。另一方面,稳定转染是另一种类型的转染,其中外源基因整合到真核细胞的基因组中。因此,外源基因会经过几代细胞。此外,外源基因的表达发生在更长的时间内。因此,瞬时转染和稳定转染之间的主要区别在于将外源基因整合到真核细胞的基因组中。
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